大肠杆菌菌液摇久了可以吗

1、具体操作1将计数板及盖片擦拭干净，并将盖片盖在计数板2将细胞悬液吸出少许，滴加在盖片边缘，使悬液充满盖片和计数板之间，静置3min，注意盖片下不要有气泡，也不能让悬液流入旁边槽中3计算板四大格细胞总数，压线细胞只计左侧和上方的然后按公式计算细胞数mL=四大格细胞总数4×104。

2、通常pcr的模板只需要微量就够了，直接使用大肠杆菌pcr，在变性加热等过程中，会有质粒释放到pcr体系中，理论上只要有一条质粒释放出来，目的基因就可以克隆出来，所以不需要先破坏细胞壁94或95度这一步能破壁，从而进入PCR的循环大肠杆菌里面的质粒PCR吧。

3、取决于你的培养基培养温度培养时间和通气量如为摇床，则为转速等多方面条件，很难说的以600nm光密度记，一般摇床培养12小时，LB液体培养基，OD600可以达到23，但是在发酵馆做高密度培养，能做到4060个OD，这差距可是相当的大2。

4、实验操作步骤如下1 编号准备9套无菌平皿，并用记号笔标记为101到109另外准备6支装有45毫升无菌水的试管，同样标记为101到1092 稀释取1毫升已经充分混合的大肠杆菌菌液，精确移取05毫升至101试管中，这即为10倍稀释多余菌液应放回原菌液将101试管置于振荡器上。

5、大肠杆菌在液体培养基中培养是需要摇床摇动或者搅拌的生长到一定浓度会浑浊如果不摇的话，浑浊菌液放置12个小时会产生沉淀如果培养基中含有脂肪类的话，有可能在液面形成菌膜。

6、先配制100Lm生理盐水，加入250m三角瓶中，再在其中加入20粒左右玻璃珠，高压灭菌然后用接种环将斜面上的菌苔刮下，接入三角瓶中，一般接12环即可或者用少量的无菌生理盐水倒入斜面中，用接种环将菌苔刮下，然后倒入三角瓶中将三角瓶振摇1分钟左右，即可制成菌悬液一般做抑菌试验都采用混菌法。

7、配好LB培养基，常规灭菌，无菌操作把冻干粉倒进去，37度摇床过夜，第二天去看就复苏好了 LB培养基1L水加10g peptone，10g NaCl，5g Yeast Extract不过一般要转接一次确认复苏成功复苏完了赶快想办法把菌给保上，有条件自己也能做冻干保 可以。

8、可通过实验验证紫外线穿透能力，具体如下准备实验材料无菌棉拭子大肠杆菌菌液琼脂平板小纸片紫外灯琼脂平板作为培养基，用于培养大肠杆菌，以直观呈现紫外线照射效果小纸片作为遮挡物，用于测试紫外线能否穿透紫外灯是产生紫外线的光源涂布菌液使用无菌的棉拭子蘸取适量大肠杆菌菌液，在。